本文標題:染色體彩繪一般用于鑒定含高度保守基因的細菌
信息分類:站內(nèi)新聞 新聞來源：未知 發(fā)布時間：2017-8-26 0:31:13
染色體彩繪一般用于鑒定含高度保守基因的細菌
染色體彩繪及原位反轉(zhuǎn)錄
另外兩種FISH技術(shù)是染色體彩繪(chromosome painting)和原
位反轉(zhuǎn)錄(in situreverse transcription, ISRT)。前一種技術(shù)用
于鑒定自然樣品中微生物群落的特殊基因，而后一種鑒定特殊mRNA
(即已經(jīng)表達的基因)。
染色體彩繪是將一段寡核昔酸探針或者將一個完整基因、一系
列基因、甚至整個基因組用一定方法消化得到的小探針與熒光標簽
結(jié)合，然后將這些探針與自然樣品中微生物的DNA雜交.染色體彩繪
一般用于鑒定含有特殊高度保守基因的細菌，如編碼固氮酶基因、
編碼光合作用反應(yīng)中心的基因、編碼特殊自養(yǎng)途徑的基因，在樣品
中根據(jù)熒光細胞的數(shù)目可分別估算固氮菌、光合細菌或自養(yǎng)菌的數(shù)
目。
原位反轉(zhuǎn)錄(ISRT) FISH與染色體彩繪不同，它用于檢測自然
樣品中細胞的基因表達.這種方法使用一種可與樣品細胞中已轉(zhuǎn)錄
的特殊mRNA雜交的探針，一旦探針發(fā)生作用時，將進行反轉(zhuǎn)錄合成
互補的DNA，并通過聚合酶鏈式反應(yīng)擴增DNA，隨后擴增的DNA再與
熒光探針反應(yīng),ISRT FISH一般用于研究自然群體中控制基因表達的
因子，并觀察特殊基因轉(zhuǎn)錄對樣品產(chǎn)生的影響。
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